الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 96 |  |  |
| | | from | 96 | | |
Abstract
وتتلخص أهداف هذه الدراسة في 4 نقاط رئيسية:1. التوصيف الجزيئي لفيروس التهاب الكبد الوبائي عند البط (DHV) الذي تم جمعه من قطعان مصابة طبيعيا في محافظة القليوبية.2. عزل وتصنيف DHV عن طريق حقن الكيس السقاء في SPF-ECE.3. تحديد ما إذا كان فيروس DHV المعزول مسبباً للأمراض من خلال إجراء اختبار الإمراضية في مجموعات عمرها يوم واحد وسبعة أيام.4. مقارنة التأثيرات المضادة للفيروسات للاستراجالوس(القتاد) والجليسيريزين (العرق سوس) على فيروس التهاب الكبد الوبائي بالإضافة الى التحصين.أ- الكشف عن الفيروس تم جمع العينات من عدة مزارع للبط البكينى بمحافظة القليوبية وكان عمر فراخ البط يتراوح من 7 إلى 12 يومًا وكانت تعاني من ترنح وضعف ووضعية opisthotonos. عند اجراء الصفة التشريحية كشفت عن تضخم الطحال والكلى والكبد مع نزيف نمش وكدمي. تم أخذ العينات في الفترة ما بين أكتوبر 2022 ويوليو 2023 واستخدمت العينات لتشخيص الفيروس بواسطة RT-PCR وكتابتها باستخدام جينات 5’ UTR وVP1. وكشف هذا عن أن عينة واحدة فقط كانت إيجابية للنمط الجيني DHAV 3. والعينة الإيجابية التي تتميز أيضًا بالتسلسل والنشوء والتطور التحليل مقارنة بالتسلسلات الأخرى المتوفرة في بنك الجينات. كشفت السلالة تحت تسلسل النيوكليوتيدات VP1 الخاص بالدراسة عن تشابه بنسبة 66.8% مع سلالة اللقاح وتشابه بنسبة 96.8% إلى 100% مع السلالات المصرية. ومن اللافت للنظر أنها كشفت عن درجة ضئيلة من تشابه النوكليوتيدات مع سلالة التطعيم المصرية DHAV-1. بعد ذلك، تم جمع العينات لعزلها في SPF-ECEs عبر طريق الكيس السقاء. أظهرت الأجنة الميتة التقزم، ونزيف تحت الجلد، ونزيف كبدي مع نخر مخضر. ظهرت هذه العلامات بعد التمريرة الثالثة. تم معايرة العينة الفيروسية وكان عيارها 106.2 EID50. تم إجراء التحدي التجريبي عن طريق حقن 500 ميكرولتر من105 EID50/ طائر عبر الطريق تحت الجلد (S/C).ب. اختبار الإمراضية تمت العدوى في عدد 60 فرخ بط عمر يوم وسبعة أيام فراخ بط بيكين وتم تشكيل مجموعتين من نفس الحجم لكل فئة عمرية. تم تعريض المجموعة الضابطة للفيروس، في حين تلقت المجموعة الأخرى تحديًا فيروسيًا مناسبًا لعمرها. تم استخدام 0.2 مل من المعايرة بالحقن تحت الجلد لتحدي فراخ البط البالغة من العمر يوم واحد، بينما تم إعطاء 0.5 مل من نفس العيار للمجموعة البالغة من العمر 7 أيام. اعتمادا على أعمارهم، تلقت مجموعات المراقبة 0.2 أو 0.5 مل من PBS المعقم. وتمت مراقبة علامات المرض في فراخ البط. تم القتل الرحيم لثلاثة فراخ بط من كل مجموعة وتم تشريحها في اليومين الثالث والسادس بعد الإصابة. تمت إزالة الكبد والطحال والكلى لتحليل الأنسجة، وتم أخذ عينات الدم لتقييم وظائف الكبد والكلى. وثبت من النتائج ان هذا الفيروس شديد الضراوة.ج- الجزء التجريبي (الغرض منه مقارنة تاثير بعض النباتات العشبية والتحصين على ضراوة الفيروس).تم تقسيم الطيور إلى ست مجموعات (20 طائراً/مجموعة)؛ وكانت هذه المجموعات على النحو التالي:1) المجموعة 1 (التحكم الإيجابي) التحدي غير المحصن والمجموعة غير المعالجة (NVCNT). تعمل هذه المجموعة كسلالة معزولة حقلية DHAV-3 حيث تم حقن هذه المجموعة بجرعة 105 EID50 بكمية 500 ميكرولتر/ طائر عن طريق الحقن تحت الجلد (S/C) في اليوم السادس من العمر.2) المجموعة 2 (التحكم السلبي) غير المحصنة وغير المتحدية وغير المعالجة (NVNCNT). تم حقن الطيور في هذه المجموعة بـ 500 ميكرولتر لكل طائر محلول PBS المعقم.
3) المجموعة 3 (المحصنة غير المعالجة) (VCNT) تم تحصين الطيور في هذه المجموعة بلقاح DVH الحي المضعف في اليوم الثالث من العمر بجرعة 500 ميكرولتر / طائر في العضل (I / M).
4) المجموعة 4 (المعالجة بالجليسيريزين غير المحصنة) (NVCGT) تم حقن الطيور في هذه المجموعة المتحدية بـ DHAV-3 ب105 EID50 بجرعة 500 ميكرولتر/ طائر عن طريق الحقن تحت الجلد في اليوم السادس من العمر ثم إعطاء الجليسيريزين عن طريق الفم لكل فرخ بط (10 ملجم/كجم من وزن الجسم) وذلك في اليوم التالي.
5) المجموعة 5 (غير المحصنة المعالجة بالقتاد) (NVCAT) عزلت الطيور في هذه المجموعة المتحدية بـ DHAV-3 105 EID50 بجرعة 500 ميكرولتر/ طائر عن طريق الحقن تحت الجلد في اليوم السادس من العمر ثم معاملتها بالقتاد فموياً لكل فرخ بط (3 ملغم/كغم من وزن الجسم) في اليوم التالي.
6) المجموعة السادسة (المحصنة المعالجة بالجليسيريزين) (VCGT) طيور هذه المجموعة المحصنة بـ DVH الحي المضعف في اليوم الثالث من العمر بجرعة 500 ميكرولتر/ طائر في العضل. تم تحديها ب DHAV-3 105 EID50 بجرعة 500 ميكرولتر/ طائر عن طريق الحقن تحت الجلد عند اليوم السادس من العمر ثم تم علاجها بالجليسيريزين عن طريق الفم لكل فرخ بط (10 ملجم/كجم من وزن الجسم).
لتقييم ومقارنة فعالية المستخلصات العشبية (Glycyrrizin فقط، Astragulus فقط)، واللقاح المتوفر واللقاح مع علاج Glycerrhizin ضد DHAV-3. تم تسجيل العلامات السريرية والوفيات وفحص ما بعد الوفاة خلال الفترة التجريبية. تم اختيار ثلاثة طيور لقياس التشريح المرضي في اليومين الرابع والسابع بعد الإصابة وأيضا في نفس الأيام تم جمع عينات الدم و وضع مضادات للتخثر لقياس الكريات الحمراء و الكريات البيضاء، LPA وأيضا تم فصل عينات المصل لقياس مؤشرات الكبد والكلى.
علامات طبيه
وقد لوحظت العلامات السريرية لمدة أسبوع واحد بعد التحدي. أظهرت مجموعة (VCGT) علامات سريرية أقل بينما أظهرت مجموعة (NVCNT) العلامات الأكثر شدة. أظهرت مجموعة (NVCAT) علامات سريرية ووفيات أكثر شدة من (NVCGT) بينما كانت مجموعات (VCNT)، (NVCAT) متشابهة تقريبًا في شدة العلامات السريرية ومعدل الوفيات.
اكتشاف ما بعد الوفاة
أظهرت المجموعة 1 (NVCNT) علامات شديدة والتي تشمل نزيف على شكل نمشات في الكبد، وتضخم ونخر الطحال، والتهابات في الكلى، وعلى العكس من ذلك، لم تظهر المجموعة 2 (NVNCNT) أي علامات. أظهرت المجموعة 3 (VCNT) درجة معتدلة من العلامات. المجموعة 4 (NVCGT)، المجموعة 6 (NVCAT) أظهرت درجة خفيفة من العلامات والمجموعة 6 كانت أقرب إلى الصورة الطبيعية. المجموعة 5 (NVCAT) أظهرت نزيف ونخر في الكبد.
اختبار وظائف الكبد والكلى
يظهر التحليل الإحصائي أن SGPT وSGOT سجلا مستويات أعلى بكثير في G1 مقارنة بـ G2 وهو أمر إيجابي بالنسبة لـ DVH. سجلت إنزيمات الكبد في G3 مستويات مرتفعة بشكل ملحوظ مقارنة بـ G4. نتائج G5 مخيبة للآمال بالمقارنة مع G4 بينما سجلت G6 أفضل النتائج مما يدل على التأثير المشترك لكل من Glycyrrhizin واللقاح. بسبب التأثير العلاجي للمستخلصات العشبية واللقاح المستخدم في التجربة، كانت مستويات الإنزيم أفضل بكثير في اليوم السابع مقارنة بالـيوم الرابع بعد التحدي.
أظهرت نتائج تصفية الكرياتينين وحمض اليوريك في المجموعة المصابة زيادات كبيرة عند مقارنتها بالمجموعة السلبية. كان للجلسيريزين مع اللقاح أفضل نتيجة من بين جميع المجموعات المعالجة. كانت النتائج في المجموعات في اليوم السابع بعد التحدي أقل بشكل كبير من اليوم الرابع بعد التحدي.