الفهرس 
LIST OF CONTENTSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 103 |  |  |
| | | from | 103 | | |
Abstract
أجريت الدراسة الحالية بقسم الكيمياء الحيوية بكلية الطب البيطري جامعة بنها لبحث الدور الوقائي لمستخلص الترنجان المخزني المرتبط بتلف الكبد الناجم عن فرط نشاط الغدة الدرقية عن طريق تنظيم التعبير الجيني Nrf-2 / Keap-1 في الجرذان المعرضة للاشعاع في المركز القومي لبحوث وتكنولوجيا الإشعاع، هيئة الطاقة الذرية المصرية. علاوة على ذلك، التأثيرات المضادة للأكسدة والمضادة للالتهابات لمستخلص الترنجان المخزني في فرط نشاط الغدة الدرقية المستحدث تجريبياً في الجرذان وتقييم الدلالات الكيميائية الحيوية والجزيئية في الغدة الدرقية وأنسجة الكبد والدم.
يعتبر الإلتروكسين والتعرض للإشعاع المؤين IR من المواد المؤكسدة القوية التي تسبب تحريض الشوادر الحرة، مما يؤدي إلى تنشيط مسار الإشارة الذي يغير نمو الخلايا
ونظرا لعدم كفاية المعرفة بتأثير مستخلص MO على تلف الكبد الناجم عن فرط نشاط الغدة الدرقية، حددت الدراسة الحالية تأثير مستخلص MO على أنسجة الغدة الدرقية والكبد في ذكور الجرذان البالغة.
اجريت الدراسه على عدد 36 جرذًا من ذكور ويستر البيضاء ، ووزن كل جرذ حوالي 120-150 جرامًا في عمر ثلاثة أشهر في البروتوكول التجريبي لهذه الدراسة. تم تقسيم الجرذان إلى ست مجموعات تحتوي كل مجموعه على 6 من الجرذان، قسمت على النحو التالي:
المجموعة الاولي: مجموعة الكونترول:
حيث تم إعطاؤها تحت الجلد 0.5 مل من المحلول الملحي الفسيولوجي.
المجموعة الثانيه: مجموعة مستخلص MO:
حيث تم علاج الجرذان فموياً بمستخلص MO (75 ملغم/كغم/يوم) لمدة أسبوعين (14 يوماً).
المجموعة الثالثه: مجموعة الالتروكسين :
حيث تم حقن الجرذان تحت الجلد بالالتروكسين (100 ملغم/ كغم/يوم) لمدة 14 يوم
المجموعة الرابعه: المجموعة المعرضه للاشعاع والمعالجه بالالتروكسين :
تم حقنها بالالتروكسين كما في المجموعة 3 وبعد الجرعة الأخيرة تم تعريضها لجرعة واحده من أشعة جاما لكامل الجسم
بجرعة قدرها 5 جراي.
المجموعة الخامسه: مجموعة الالتروكسين + مستخلص MO :
شملت الجرذان المحقونة بالألتروكسين والتي عولجت بمستخلص MO (75 (ملغم/كغم/يوم) لمدة أسبوعين في بداية اليوم الثامن من حقن الألتروكسين واستمرت لمدة أسبوع آخر.
المجموعة السادسه: المجموعة المعرضه للاشعاع والمعالجه بالالتروكسين + مستخلص MO :
تم حقن الجرذان بالالتروكسين كما في المجموعة 3 وبعد الجرعة الأخيرة تم تعريضها لأشعة جاما لكامل الجسم بجرعة قدرها 5 جراي وأيضا عولجت بمستخلص MO (75 ملغم/كغم/يوم) لمدة أسبوعين في بداية اليوم الثامن من حقن الألتروكسين واستمرت لمدة أسبوع آخر.
جمع عينات الدم وأنسجة الغدة الدرقية والكبد:
في نهاية التجربة، تم ذبح جميع الجرذان وجمعت عينات الدم عن طريق ثقب القلب وفقًا للمجلس الأخلاقي المؤسسي لرعاية الحيوان واستخدامه (BUFVTM 05-04-22) وتم استخدام المصل الناتج لمزيد من التقديرات البيوكيميائية: نشاط انزيمات AST)( Aspartate transaminase و( Alanine transaminase ALT. تم فصل أنسجة الغدة الدرقية والكبد على الفور، وغسلها بمحلول ملحي فسيولوجي بنسبة 0.9٪ وتقسيمها إلى قسمين. تم تخزين الجزء الأول عند -80 درجة مئوية لمزيد من التحاليل.
تم استخدام 1- انسجة الكبد في :
أ - المؤشرات الحيوية للإجهاد التأكسدي: NO ، CAT ،SOD ، GSH،MDA ، GPx ، Keap1 ، إجمالي محتوى 2 Nrf النووي
ب - علامات الالتهاب: ,TNF α TGF-β1، MCP 1، SDF-1α، α-SMA
2- عينات الدم: TSH , T3،T4،Total protein (TP)، ALB،glob،AST،ALT
بينما تم استخدام الجزء الثاني من أنسجة الكبد والغدة لإجراء الفحوصات النسيجيه
ويمكن تلخيص نتائج هذه الدراسة على النحو التالي:
آثار مستخلص MO على حالة هرمونات الغدة الدرقية ووظيفة الكبد: تم تقييم تأثيرات العلاج بمستخلص MO لمدة 14 يومًا على مستويات الدم من هرمونات الغدة الدرقية (TSH، T4 و T3 ) وقد لوحظ انخفاض ملحوظ في مستويات TSH في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية. علاوة على ذلك، ارتفعت مستويات T3 و4T بشكل ملحوظ في مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بالمجموعة الضابطة. على العكس من ذلك، فإن جرعة مستخرج ال MO عكست تأثير الألتروكسين + IR على الغدة الدرقية عن طريق رفع مستوى هرمون TSH مع خفض مستويات كل من 3 T و T4، ونتيجة لفرط نشاط الغدة الدرقية، فإن ذلك يمثل زيادة واضحة في أنشطة كل من ALT وAST في مجموعة الألتروكسين + IR مقارنة بالمجموعة الضابطة. علاوة على ذلك، أظهرت هذه الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية انخفاضًا ملحوظًا في مستويات TP والألبومين والجلوبيولين مقارنة بنظيراتها الطبيعية. على العكس من ذلك، أدى العلاج بمستخلص MO إلى تحسين وظيفة الكبد بشكل فعال من خلال تقليل أنشطة الإنزيمات الكبدية ALT و AST المصاحبة لتعزيز إنتاج الكبد للبروتينات (TP، Alb، وGlob.)
تأثير مستخلص MO على ضعف حالة الأكسدة الكبدية
أظهرت النتائج الحالية زيادة كبيرة في مستويات MDA وكذلك مستويات NO في الأنسجة الكبدية لدى جرذان فرط نشاط الغدة الدرقية الناجم عن Elt+ IR مقارنة بجرذان المجموعة الضابطة ، في المقابل، عند العلاج بمستخلص MO. لوحظ انخفاض كبير في مستويات علامات الإجهاد التأكسديMDA و NO
تأثير مستخلص MO على نظام مضادات الأكسدة
انخفاض كبير في مستويات GSH وكذلك أنشطة الإنزيمات المضادة للأكسدة (CAT وSOD وGPx) في الأنسجة الكبدية لدى جرذان فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بجرذان المجموعة الضابطة. وفي الوقت نفسه، أظهرت الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية المعالجة بمستخلص MO تحسنًا واضحًا في نظام مضادات الأكسدة عن طريق تخفيف تأثير Elt+ IR.آثار مستخلص MO على تعبير Nrf2 / Keap-1 الكبدي
كشفت النتائج الحالية عن زيادة معتدلة في تعبير mRNA لجين Nrf2 إلى جانب الارتفاع الواضح في التعبير عن جين Keap-1 مقارنة بجرذان المجموعة الضابطة. على العكس من ذلك، فإن علاج الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية بمستخلص MO ينظم بشكل كبير التعبير الجيني لـ2 Nrf مع قمع جين Keap-1 في الأنسجة الكبدية.
آثار مستخلص MO على علامات الالتهاب الكبدي
أظهرت النتائج ارتفاع ملحوظ في التعبير الجيني لعلامات الالتهابات (TNF-α وMCP 1 ) في الأنسجة الكبدية لدى جرذان فرط نشاط الغدة الدرقية مقارنة بجرذان المجموعة الضابطة. ومن المثير للجدل أن الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية التي عولجت بمستخلص MO أظهرت انخفاض ملحوظ في التعبير الجيني لعلامات الالتهابات.
تأثير مستخلص MO على التليف الكبدي
ارتفاع واضح في تعبير mRNA لكل من TGF-β1 و-1 α SDF و α-SMA في الأنسجة الكبدية لجرذان فرط نشاط الغدة الدرقية مقابل جرذان المجموعة الضابطة. وفي الوقت نفسه، أدى العلاج بمستخلص MO إلى تخفيف التليف الكبدي عن طريق تثبيط التعبير عن دلالات التليف.
الفحوصات النسيجية:
بالإضافة إلى ذلك، أظهر الفحص النسيجي لأنسجة الكبد لدى الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية تلفًا في أنسجة الكبد يتمثل في تضخم خلايا الكبد (الدرجة الرابعة) وبدلاً من ذلك، فإن علاج الجرذان المصابة بفرط نشاط الغدة الدرقية بمستخلص MO خفف من التغيرات ذات الصلة عن طريق الحد من تضخم خلايا الكبد، بالتزامن مع تحسين الجيوب الكبدية (الدرجة الثانية).
كل هذه النتائج تدعم أن مستخلص MO يحافظ على وظائف الغدة الدرقية ويخفف من تلف الكبد الناجم عن فرط نشاط الغدة الدرقية عن طريق تحسين سلامتها الوظيفية.