الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 167 |  |  |
| | | from | 167 | | |
Abstract
العدوى الفطرية شائعة جدًا وتمثل مشكلة عالمية يجب حلها، خاصة في البلدان النامية حيث تنتشر مثل هذه العدوى بشكل واسع. يتعرض للإصابة بالعدوى الفطرية حوالي 40 مليون فرد، مما يؤدي إلى وفاة أكثر من 1.5 مليون شخص سنويًا، ويؤثر ذلك في المقام الأول على الأفراد الذين يعانون من ضعف في المناعة. عادةً ما يتعرض الجلد أولاً للعدوى ، ثم تتقدم إلى طبقات أعماق، مما يؤدي إلى تشكل ”الفطريات الجلدية”.
و عندما يتم اختراق العدوى إلى طبقات الجلد الأعماق، يُسمى هذا الوضع ب ”الفطريات تحت الجلد”. لذا، يجب أن يستهدف العلاج المضاد للفطريات جميع الأنواع، أي العدوى الجلدية وتحت الجلد. تشكل العدوى الفطرية تهديدًا كبيرًا لصحة الإنسان، حيث تؤثر على جوانب متعددة من الحياة. يمكن للأفراد الأصحاء أن يعانوا من العدوى الفطرية موضعيا، بما في ذلك الأنواع الجلدية وتحت الجلد، وأحيانًا العدوى الجهازية.
تلك الأمراض الفطرية يمكن أن تظهر في مجموعة من الحالات، بدءًا من مشاكل شائعة مثل فطريات الأظافر وقدم الرياضيين إلى العدوى الأكثر خطورة وانتشارًا مثل الهستوبلازموز و هو مرض يشبه الإنفلونزا يسببه استنشاق بوغاHistoplasma capsulatum وقد يؤدي إلى ضرر في الرئتين أو انتشاره إلى الجهاز العصبي المركزى.
تم ملاحظة العديد من التفاعلات الجانبية الضارة عند تناول العقارات المضادة للفطريات عن طريق الفم. وبتوجيه الانتباه إلى القيود والتفاعلات الضارة المحتملة المرتبطة بتناول العقارات المضادة للفطريات عن طريق الفم، جذب اهتمام الباحثين أنظمة التوصيل الموضعي.
يقوم الجلد البشري، كأكبر عضو في الجسم، بشكل دائم بأداء وظيفة حيوية من خلال أدائه دور حاجز واقي ضد فقدان الماء الخارجي والعديد من التهديدات الخارجية . مساحته الواسعة وسهولة الوصول إليه، يجعله مساهمًا أساسيًا ولا غنى عنه في مجال توصيل الدواء. ومع ذلك، قد تتداخل هذه الوظيفة الواقية أو تحول دون توصيل فعّال للأدوية من خلال الجلد.
تلعب أنظمة توصيل الدواء عبر الجلد دورًا حاسمًا في السوق الصيدلي، حيث تقدم حلاً من التركيبات التقليدية و التركيبات المتقدمة. لذا، يُفضل استخدام أنظمة توصيل موضعية لتحقيق توصيل فعّال لمضادات الفطريات عبر الجلد مع تقليل الآثار الجانبية
أدت الحاجة إلى تعزيز اختراق هذه العقاقير عبر حاجز الجلد إلى استكشاف نظم نانوية حويصلية مبتكرة. للتغلب على وظيفة حاجز الجلد و توصيل العقار إلى موضع العمل العمل المستهدف بشكل فعال، يمكن اتباع نهجين رئيسيين لتعزيز اختراق الدواء: إما دمج محفزات الاختراق الخارجية أو تغليف الدواء في نظام حامل مبتكر .يشمل النهج الأخير تطوير حويصلات نانوية فائقة المرونة تسهل اختراق الدواء عن طريق المرور عبر مسام الجلد الضيقة، مما يسمح بتحسين ترسيب الدواء. الحويصلات النانوية القائمة على الدهون التي تحتوي على محفزات الاختراق، المعروفة باسم ”الحويصلات المحتوية على محفزات الاختراق” (PEVs) واحدة من بين الحويصلات النانوية الواعدة التي تعتمد على الدهون فى تكوينها، والتي تجمع بين مزايا كل من النهجين. فهي تمثل فئة فريدة من الليبوسومات التي تتكون عن طريق دمج محفزات الاختراق إلى طبقاتها الدهنية. و تعد محفزات الاختراق مركبات تساعد في نقل الأدوية أو غيرها من المواد عبر طبقات الجلد بشكل رئيسي و خاصة عبر الطبقة القرنية، وهي الحاجز الرئيسي للجلد.
تمثل الحويصلات المحتوية على محفزات الاختراق فئة فريدة من نوعها من الليبوسومات تم تكوينها عن طريق دمج محفزات الاختراق في طبقاتها الدهنية. تلعب هذه المحفزات دورًا حاسمًا في تسييل الغشاء الدهني للحويصلات، مما يمنحها مرونة، تسهل عبورها عبر الطبقة القرنية للجلد، مما يسهل تسليم الدواء.
وعلاوة على ذلك، أثبتت إضافة محفزات الاختراق إلى الناقلات النانوية المحملة بمضادات للفطريات فعالية أكبر في توصيل هذه العقارقير وفي علاج العدوى الفطرية. وبالتالي، تم تصنيع حويصلات فائقة المرونة (PEVs) لاختبار هذا النهج.
اعطاء مضادات الفطريات الأزول عبر الجلد لعلاج العدوى الفطرية يشكل تحديًا كبيرًا حيث تعمل الطبقة القرنية كحاجز يقيد اختراقها. بالإضافة إلى ذلك فإن الوزن الجزيئي الكبير للأزول يجعله أقل ملاءمة للاستخدام الموضعي الفعّال، مما يستلزم تركيزات أعلى أو جرعات متكررة. مما قد يؤدي بالتالي لإمتصاص الدواء ليصل إلى الدم )الامتصاص الدورى(، مما يؤدي إلى ظهور آثار جانبية ويقلل من فعالية الأزول الموضعي.
في هذه الرسالة تم تحضير حويصلات محتوية على الفلوكونازول و هو مركب ثيازول ثلاثي اصطناعي مضاد للفطريات، يعد امن جدا لان آثاره الجانبية بسيطة، ويُمكن ان يؤخذ عن طريق الفم، أو عن طريق الحقن، أو موضعيًا لعلاج الفطريات سواء موضعيًا أو لتوصيله للدم عن طريق الجلد. يمكن أن يساعد صياغة الفلوكونازول في التركيبات الموضعية في منع الآثار الجانبية الغير مرغوب فيها المرتبطة بطرق التناول الأخرى.
كان الهدف من هذا العمل هو تحضير وتحسين PEVs التي تحتوي على الفلوكونازول الموضعي باستخدام لابراسول أو ترانسكوتول كمحسنات للاختراق بهدف تعظيم اختراق الفلوكونازول من خلال طبقات الجلد العميقة. علاوة على ذلك، تم توصيف الصيغ المختارة من حيث حجم الجسيمات، والجهد الكهربائي زيتا، كفاءة حويصلة العقار داخل الحويصلات (EE%) وترسيب الجلد الخارجي، والفعل الدوائي في الجسم، وثبات الصيغ المختارة.ولذلك، فقد تم تحضير الفلوكونازول في الحويصلات PEVs فائقة المرونة لاختبار هذا النهج في هذه الدراسة، وقد استُخدمت Labrasol® وTranscutol® كمحفزات اختراق لتحضير الحويصلات PEVs فائقة المرونة.
و تنقسم الدراسة في هذه الرسالة إلى فصلين:
الفصل الأول:- تحضير و توصيف أنظمة توصيل حويصلية محتوية على عقار الفلوكونازول
الفصل الثاني: -دراسة مدى فاعلية أنظمة التوصيل الحويصلية المحتوية على عقار الفلوكونازول في القضاء على الإصابة الفطرية في الفئران.
الفصل الأول:- تحضير و توصيف أنظمة توصيل حويصلية محتوية على عقار الفلوكونازول:
تناول هذا الفصل صياغة و توصيف حويصلات الفلوكونازول المحتوية على محسنات إختراق بطريقة حقن الإيثانول و هي تقنية تستخدم لإعداد الحويصلات النانوية القائمة على الدهون. في هذه الطريقة، يتم حل الفسفوليبيد ( ليبويد S-100 ) في مذيب عضوي، وعادة ما يكون الإيثانول، حيث يتم تسخينه إلى 60 درجة مئوية وحقنه في محلول مائي (تم تسخينه أيضا إلى 60 درجة مئوية) يحتوي على عامل محسن الإختراق و هو (5-10٪w/w) ترانسكوتول أو لابرازول، و يتم تقليب المرحلة المائية ميكانيكيًا. مما يؤدي ذلك إلى التكوين السريع للحويصلات.
تم إجراء توصيف لهذه الأنظمة ، والذي اشتمل على تقييم مختلف المعايير مثل حجم الجسيمات، والشحنة (جهد الزيتا ) بإستخدام جهاز Zetasizer، و اختبار شكل الحويصلات باستخدام المجهر الإلكتروني )عبر الانتقال الإلكترونات(. كما تم تحديد كفاءة حويصلة العقار داخل الحويصلات (EE%) للتركيبات المختارة و تم فصل الدواء الحر عن الدواء المتحوصل وقياس نسبة الدواء المتحوصل.
و لدراسة معدل إختراق الدواء تم إجراء تجارب Ex-vivo . تم اجراء هذه التجارب باستخدام خلية فرانز (Franz diffusion cell) حيث تم وضع جلد الفأر بين الجزء المانح والجزء الاستقبالي، مع فص القشرة المتقيحة مواجهًا للجزء المانح. ثم تم عزل فص القشرة المتقيحة بإستخدام طريقة ال tape stripping وتم فصل الطبقة الخارجية عن الدبقية باستخدام مشرط. تم استخراج الفلوكونازول من كل من الجلد والشريط عن طريق إستخراجها باستخدام ميثانول. تم تصفية الميثانول بعد ذلك وحقنه في جهاز HPLCلقياس تراكم الدواء في مختلف طبقات الجلد.
و لدراسة معدل ثبات الصياغة المختارة تمت تقييم الصيغة المختارة من حيث استقرارها الفيزيائي عن طريق إعادة قياس حجم الجسيمات الخاصة بها، والشحنة الكهربائية السطحية ( جهد زيتا)، وكفاءة حويصلة العقار داخل الحويصلات (EE%) بعد ستة أشهر من التخزين. تم تخزين العينات في الثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين 2-8 درجة مئوية طوال فترة التخزين.
و قد كانت أهم النتائج ما يلي:-
• تم تحضير الحويصلات التي تحتوي على المواد المساعدة للإختراق بنجاح بواسطة طريقة حقن الإيثانول.
• كشفت النتائج عن أن أحجام الجسيمات تراوحت بين 100.29 و762.4 نانومتر.
• جميع الحويصلات كانت تحمل شحنة سالبة بمتوسط جهد زيتا يصل إلى -38.26 مللي فولت.
• وصلت نسبة حوصلة الدواء داخل الحويصلات مستوى متوسط يقدر بحوالي 39.88%.
• تم فحص الحويصلات تحت المجهر الإلكتروني و كانت دائرية الشكل
• تم تأكيد فعالية الحويصلات الفسفوليبيدية المستندة على الفوسفوليبيدات (PEVs) المختارة في إيداع الفلوكونازول في طبقات الجلد العميقة من خلال اختبار الاختراق ex-vivo فى جلد الفأر الأبيض. وقد أظهرت L12 التي تحتوى على (10%w/w) لابرازول أعلى ايداع للفلوكونازول في الجلد، و كان الضعف مقارنة بالجل المرجعي.
• وكانت نسبة الاختراق للتركيبات ضئيلة جدا حيث كانت ٠.٣٨ (%w/w)مما يدل على تمركزها في طبقات الجلد و عدم مرورها للدورة الدموية.
• وقد لوحظ تراكم الدواء لجميع التركيبات في الأعلى عند طبقة الدبق، مما يبرز إمكانية الحويصلات الفسفوليبيدية، وخاصة L12، في تحسين توصيل الفلوكونازول الموضعي وتحسين نتائج العلاج.
• وأشارت النتائج إلى أن الحويصلات الفسفوليبيدية يمكن أن تكون حاملًا واعدا للفلوكونازول في التطبيقات الموضعية.
• لضمان ثبات هذه التركيبات، أظهرت دراسات الثبات التي أُجريت على مدى فترة ستة أشهر ثباتا جيدًا للتركيبات، مع تغيرات غير ملحوظة في حجم الجسيمات و الجهد الكهربائي وكفاءة حوصلة الدواء.
الفصل الثاني: -دراسة مدى فاعلية أنظمة التوصيل الحويصلية المحتوية على عقار الفلوكونازول في القضاء على الإصابة الفطرية في الفئران.
تناول هذا الفصل التجارب على الحيوانات ، أولا تمت إصابة الفئران بالفطريات، باستخدام الكانديدا ألبيكانز. و ذلك عن طريق حلاقة ظهر الفئران التي تم حقنها بال cyclophosphamide لتثبيطها المناعة ثم إضافة الكانديدا المحضرة إلى الجلد وفركه بلطف.
ثم تم تقسيم الفئران إلى أربع مجموعات:
المجموعة الأولى : لم يتم إصابة الفئران ولم يتم تلقي أي علاج.
المجموعة الثانية: تمت إصابة الفئران ولكنها لم تتلق أي علاج.
المجموعة الثالثة: تم إصابة الفئران وتلقي معلق PEVs للفلوكونازول.
المجموعة الرابعة: تم إصابة الفئران وتلقي جل الفلوكونازول التقليدي.
تم تطبيق العلاج مرة واحدة يوميًا لمدة سبعة أيام متتالية. تمت الت