الفهرس 
ACKNOWLEDGEMENTOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 164 |  |  |
| | | from | 164 | | |
Abstract
تتميز مبيدات الآفات العضوية الفسفورية بالتطبيق الواسع النطاق والكفاءة العالية مع التوسع السريع في الزراعة. فهي ضرورية في الوقاية من الأمراض والآفات الزراعية وعلاجها. منذ عام 1960، احتلت مبيدات الآفات العضوية الفسفورية أعلى حصة في السوق من مبيدات الآفات (19 ٪ من السوق العالمية). الديازينون (O، O-diethyl-O- [6-methyl-2- (1-methyl-ethyl) -4-pyrimidine] thiophosphate) هو مبيد حشري واسع النطاق، عالي الفعالية، متوسط إلي منخفض السمية. المخلفات البيئية للديازينون تعتبر واحدة من أكثر المشكلات اكتشافًا في المياه الجوفية ومياه الشرب والمياه السطحية، وهي مشكلة خطيرة بشكل خاص. يمكن أن تؤثر المخلفات البيئية للديازينون على الكائنات الحية غير المستهدفة من خلال الهواء والماء والتربة والسلسلة الغذائية. يمكن أن تصل هذه الملوثات إلي الانسان أو الحيوانات عبر طرق مختلفة مثل الهواء والماء، والأطعمة، والفواكه، والخضروات. ويمكن أن تلحق الضرر بأعضاء مختلفة مثل الكبد والكلى والخصيتين والجهاز المناعي والقلب والجهاز العصبي والتناسلي والجهاز التنفسي مباشرة. بالإضافة إلى ذلك، قد تؤدي هذه الملوثات إلى تغيرات وراثية وأمراض مثل السرطان.
تعتبر أمراض الكلى إحدى المشاكل الصحية العامة في جميع أنحاء العالم وتؤثر على الملايين من الناس وقد زاد انتشارها بسرعة في السنوات الأخيرة. ونظرًا للأسباب المتعددة للفشل الكلوي، فقد تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية لتعزيز فهمنا لاعتلال الكلية. من بين هذه النماذج التجريبية، يتم استخدام الفئران على نطاق واسع لتمكين فهم ودراسة أمراض الكلى وتطورها، وكذلك لتحديد الأهداف المحتملة للعلاج.
في دراستنا، قمنا بفحص دور الإجهاد التأكسدي في اعتلال الكلية الناجم عن الديازينون وآليته المحتملة. علاوة على ذلك، قمنا بفحص أدوار سيليمارين والثيموكينون (المادة الفعالة في الحبة السوداء) وإن أسيتيل سيستئين في تنظيم مسارات الإشارات المتعددة المتعلقة بالالتهاب والإجهاد التأكسدي في الإجهاد التأكسدي الناجم عن الديازينون في ذكور فئران البيضاء. لقد درسنا أيضًا التأثيرات المضادة للالتهابات ومضادات الاستماتة للأدوية محل الدراسة في اعتلال الكلية الناجم عن الديازينون.
في دراستنا، استخدمنا 96 فأرًا من ذكور الجرذان البيضاء مقسمة إلى ثلاث تجارب مختلفة لتقييم أدوار الأدوية المحتملة المختلفة لتخفيف التأثير الكلوي للديازينون. كان الهدف من البحث الأول (الفصل الثاني) هو معرفة كيف يغير الثيموكينون السمية التي يسببها الديازينون في الفئران. أجريت التجربة الأولي على 36 من ذكور الفئران البيضاء مقسمة إلى 6 مجموعات تجريبية: المجموعة الضابطة (محلول ملحي، مرة واحدة يومياً، للحقن داخل المعدة). مجموعة التحكم الضابطة (زيت الزيتون) (0.1 مل من زيت الزيتون، مرة واحدة يوميًا، للحقن داخل المعدة)؛ تلقى التحكم الضابطة (DMSO) 0,1 ملليليتر من محلول DMSO بتركيز نهائي أقل من 0.5٪ (كحامل للثيموكينون)؛ مجموعة الثيموكينون (10 مجم / كجم، مرة واحدة يوميًا، حقن داخل المعدة)؛ مجموعة الديازينون (15 مجم / كجم، مرة واحدة يوميًا، حقن داخل المعدة). تلقت مجموعة الثيموكينون+الديازينون 10 مجم/كجم من الثيموكينون يوميًا قبل ساعة واحدة من الديازينون بجرعة 15 مجم/ كجم. تم إعطاء المحلول الملحي والثيموكينون و / أو الديازينون لمدة 4 أسابيع. تم فصل المصل، وجمع أنسجة الكلى، لتقييم علامات الإجهاد البيوكيميائي والتأكسدي، وكذلك التغيرات النسيجية والكيميائية المناعية. تمت زيادة مستويات الكرياتينين واليوريا بشكل ملحوظ في المجموعات المعالجة بالديازينون عند مقارنتها بمجموعة التحكم. كان تركيز malondialdehyde (MDA) في أنسجة الكلى للمجموعات المعالجة بـالديازينون أعلى بكثير منه في المجموعات الأخرى. تم تخفيض كاتالاز (CAT)، ديسموتاز الفائق (SOD)، الجلوتاثيون بيروكسيديز (GPx)، ومستويات الجلوتاثيون المخفضة (GSH) في أنسجة الكلى بشكل ملحوظ في المجموعات المعالجة بـ DZN مقارنة بالمجموعات الأخرى. بالإضافة إلى ذلك، أدى تسمم DZN إلى زيادة السيتوكينات الالتهابية في الدم IL-1β، وproapoptotic (BAX) وانخفاض العوامل المضادة للخلايا (BCL2). علاوة على ذلك، فإن ضعف وظائف الكلى يتوافق مع التشريح المرضي بزيادة ترسب ألياف الكولاجين والتعبير عن TNF-α وCOX2 في الأنسجة الكلوية. علاوة على ذلك، قلل الديازينون من التعبير الجيني لــ Keap-1 وNrf2 وHO-1 وزاد من التعبير الجيني لــــ NFκB في الأنسجة الكلوية. أوضحت الدراسة يمكن أن تحفيز الثيموكينون لحماية واضحة للكلى من خلال نشاطه المضاد للأكسدة وكذلك التأثيرات المضادة للالتهابات ومضادات التبول. لذلك، يُقترح أن يكون للثيموكينون تأثيرات مفيدة للوقاية من السمية الكلوية التي يسببها الديازينون في الفئران عبر مسار إشارات Keap1 / Nrf2 / HO1 / NQO.
وكان الهدف من البحث الثاني (الفصل الثالث) هو دراسة الآلية الجزيئية المحتملة الكامنة وراء الفوائد الوقائية لسيليمارين ضد السمية الكلوية الحادة التي يسببها الديازينون مع التركيز بشكل خاص على دور مسار إشارات Keap1-Nrf2 / heme Oxygenase-1 لتقليل الإجهاد التأكسدي الناجم عن الديازينون. تم تقسيم الحيوانات إلي خمس مجموعات متساوية من ثلاثين من ذكور الفئران البيضاء بشكل عشوائي. تم الحفاظ على المجموعة الأولي (المجموعة الضابطة) (G1) في ظروف تحكم نموذجية وتم إعطاؤها محلول ملحي مرة واحدة يوميًا (حقن داخل المعدة) لمدة 4 أسابيع؛ تم تجريع المجموعة الثانية (G2) 0.1ملليتر من زيت الزيتون داخل المعدة لمدة 4 أسابيع. تم تجريع المجموعة الثالثة (G3) سيليمارين داخل المعدة بجرعة 200 مجم / كجم يوميًا كمحلول مائي لمدة 4 أسابيع؛ تم تجريع المجموعة الرابعة (G4) ديازينون داخل المعدة بجرعة 15 مجم / كجم يوميًا لمدة 4 أسابيع؛ والمجموعة الخامسة G5 تم تجريعها سيليمارين داخل المعدة يوميًا قبل ساعة واحدة من الديازينون بنفس الجرعة في المجموعات الثالثة والرابعة G3 و G4 لمدة 4 أسابيع. اظهرت النتائج أن السيليمارين يقلل من الاختلالات الكلوية التي يسببها الديازينون من خلال استعادة مستويات اليوريا والكرياتينين وكذلك مؤشرات الأكسدة. على الرغم من أن تعبير Keap-1 الجيني كان مرتفعًا أيضًا، إلا أن الإفراط في التعبير الحيني عن Nrf2 عزز أيضًا من التعبير عن الهيم أوكسيجيناز -1 (HO-1)، وهو إنزيم مستهدف حاسم لـ Nrf2. نتيجة لذلك، يُفترض أن السيليمارين قد يكون مفيدًا في الوقاية من السمية الكلوية التي يسببها تجريع الديازينون.
يهدف الفصل الرابع (البحث الثالث) إلى دراسة فعالية إن أسيتيل سيستين ضد السمية الكلوية التي يسببها الديازينون في ذكور الفئران البيضاء. تم تقسيم الفئران إلى خمس مجموعات كل منها ست حيوانات: تم تربية المجموعات في ظروف تحكم نموذجية وتم تجريع المجموعة الاولي (المجموعة الضابطة) (G1) محلولًا ملحيًا مرة واحدة يوميًا (داخل المعدة) لمدة 4 أسابيع؛ تم تجريع المجموعة الثانية G2 0.1 ملليتر من زيت الزيتون داخل المعدة لمدة 4 أسابيع. تم تجريع المجموعة الثالثة (G3) 150مجم / كجم يوميًا من إن أسيتيل سيستئين كمحلول مائي لمدة 4 أسابيع؛ تم تجريع المجموعة الرابعة (G4) ديازينون داخل المعدة بجرعة 15 مجم / كجم يوميًا لمدة 4 أسابيع؛ في حين أن المجموعة الخامسة G5 تم تجريعها داخل المعدة إن أسيتيل سيستين يوميًا قبل ساعة واحدة من الديازينون بنفس الجرعة في المجموعات G3 وG4 لمدة 4 أسابيع. أدى تجريع الديازينون إلى إضعاف بنية الكلى ووظيفتها، كما اتضح من التشريح المرضي والكيمياء المناعية والتعبير الجيني عن NLRP3 و NFκB و IKB و BCL2 و BAX mRNA. تظهر النتائج التي توصلنا إليها أن إن أسيتيل سيستئين يقلل من الاختلالات الكلوية التي يسببها الديازينون عن طريق استعادة مستويات اليوريا والكرياتينين وكذلك مؤشرات الأكسدة. علاوة على ذلك، تم تحسين تركيزات علامات الالتهاب المصل (IL-1β وα-TNF) بواسطة العلاج بــ إن أسيتيل سيستئين. ومع ذلك، فقد أظهر إن أسيتيل سيستئين أن له دورًا مفيدًا ضد السمية الكلوية من خلال عكس البنية الخلوية وتقليل تنظيم الالتهابات (NLRP3 و NFκB و IKB) والاستماتة (BAX) وكذلك جينات BCL2 المنتظمة والبروتينات في أنسجة الكلى ، مما يجعلها شبه طبيعية المستويات. علاوة على ذلك، كشف فحص IHC للأنسجة الكلوية عن تقليل تعبير α-TNF بسبب العلاج بــ إن أسيتيل سيستئين. لذلك، يمكن استخدام إن أسيتيل سيستئين لحماية الكلى من التغيرات المرضية التي يسببها الديازينون.
خلصنا من دراستنا:
1. الثيموكينون له آثار مفيدة للوقاية من السمية الكلوية التي يسببها الديازينون في الفئران البيضاء عبر مسار إشارات Keap1 / Nrf2 / HO1 / NQO.
2. السيليمارين مفيدًا في الوقاية من السمية الكلوية التي يسببها الديازينون عبر مسار إشارات Keap1-Nrf2 / heme أوكسيجيناز -1.
3. يمكن استخدام إن أسيتيل سيستئين لحماية الكلى من التغيرات المرضية التي يسببها الديازينون عن طريق عكس البنية الخلوية وتقليل تنظيم الالتهابات (NLRP3 و NFκB و IKB) والاستماتة (BAX) وكذلك جينات BCL2 والبروتينات في أنسجة الكلى، إلى مستويات شبه طبيعية.