Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Isolation, Molecular Identification of Some Lipase- Producing Bacteria and Purification of Lipase Enzyme for Some Applications /
المؤلف
Mohamed, Hayam Sayed Thabet
هيئة الاعداد
باحث / هيام سيد ثابت محمد
مشرف / اسماعيل صديق محمد
مشرف / وجدان عبد الحميد محمد
مناقش / شيماء يوسف السيد
مناقش / احمد محمود محمد سيد
الموضوع
Microbiology.
تاريخ النشر
2023.
عدد الصفحات
134 p.:
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
البيطري
الناشر
تاريخ الإجازة
2/8/2023
مكان الإجازة
جامعة أسيوط - كلية الطب البيطري - الميكروبيولوجيا والمناعة
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 149

from 149

Abstract

تتزايد الحاجة إلى الإنزيمات فى الكثير من الصناعات نظرًا لمزاياها العديدة ، مثل الحد الأدنى من السمية البيئية. فإنزيمات الليباز هي واحدة من أكثر الإنزيمات المستخدمة في التكنولوجيا الحيوية قيمة. و نتيجة لذلك، أصبحت الدراسات التي تجرى على إنزيم الليباز تحظى بشعبية كبيرة في مجال علم الإنزيمات في السنوات الأخيرة. حيث تم إجراء عدة محاولات لعزل سلالات بكتيرية مختلفة يمكنها إنتاج إنزيم الليباز.
وتهدف الدراسة الحالية إلى عزل البكتيريا المنتجة للليباز من مصادر مختلفة مثل التربة الملوثة بالزيت ، جروح الحيوانات ، ووسط الاستزراع الملوث. كما هدفت إلى دراسة العوامل التي تؤثر على إنتاج إنزيم الليباز من السلالة الأكثر إنتاجًا باستخدام طريقة عامل واحد في كل مرة. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء تنقية جزئية لإنزيم الليباز وتحسين كفاءته التحفيزية؛ لاستخدام الإنزيم في تطبيقات مختلفة. يمكن تلخيص هذه الدراسة في النقاط الآتية:-
• في هذه الدراسة تم الحصول على 125 سلالة بكتيرية من مصادر مختلفة. تم تحديد 42 سلالة فقط لإنتاج إنزيم الليباز باستخدام وسط توين 80 أجار، كطريقة فحص نوعي.
• عند اختبار نشاط الليباز، تم التعرف على النمط الظاهري لأعلى 20 سلالة منتجة للليباز تم التعرف جزيئيًا على العزلات الثلاث الأكثر فاعلية، لإنتاج إنزيم الليباز باستخدام تسلسل الجين 16S الرنا الريباسي، وهما Brevibacillus sp. سلالة HC1 وBrevibacillus sp. سلالة HS5 و Brevibacillus parabrevisسلالةHS20 وسجلوا في بنك الجينات بارقام انضمام (OR048061) ، (OR048060) ، و (OR361809) على التوالي.
• تم تسجيل أقصى إنتاج لإنزيم الليباز بواسطة Brevibacillus parabrevis سلالة HS20 عند 35 درجة مئوية ودرجة الحموضة 7.0 و 3٪ حجم لقاح مع توين 80 كمحفز تحت ظروف الاهتزاز.
• تمت تنقية إنزيم الليباز المنتج بواسطة Brevibacillus parabrevis سلالة HS20 جزئياً بطريقة ترسيب البروتين باستخدام الأسيتون. علاوة على ذلك ، تم تحميل إنزيم الليباز المنقى جزئيًا على Fe-MOF؛ لتعزيز كفاءته التحفيزية. تم تأكيد التحميل الناجح عن طريق كثير من التقنيات، بما في ذلك FT-IR و SEM و EDX و TEM ، بكفاءة التثبيت وقدرة التحميل 60.73٪ و 18.88٪ على التوالي.
• تم تقييم النشاط التحفيزي لإنزيم الليباز المحمل على Fe-MOF مقارنة بالشكل الحر في وجود عدة منظفات تجارية بالإضافة إلى فعاليتها في أداء الغسيل. أشارت النتيجة إلى أن الشكل المحمل لإنزيم الليباز كان أكثر ثباتًا من الشكل الحر، وأكثر توافقًا مع مكونات منظف أريال. بالإضافة إلى ذلك ، أدى وجود إنزيم الليباز ، وبخاصة الشكل المحمل، إلى تحسين كفاءة إزالة الزيت من قطع القماش.
• تم تقييم قدرة إنزيم الليباز على تثبيط تكوين الأغشية الحيوية ضدPseudomonas aeurginosa سلالة HW13 في كل من الاشكال الحرة والمحملة. وجد أن الشكل المحمل يمكن أن يقمع الأغشية الحيوية بشكل أكثر فعالية من الشكل الحر. كما تم الاشارة أيضًا الى أن الشكل الثابت للإنزيم بتركيز 500 وحدة يمكن أن يمنع تكوين البيوفيلم تمامًا.
• استخدمنا أيضًاBrevibacillus parabrevis سلالة HS20 كنظام كامل لمعالجة مياه الصرف الزيتية الاصطناعية. أوضحت النتائج أنه بعد 24 ، 48 ، 72 ساعة أدى إلى تكسير الزيت الناتج عن مياه الصرف الصناعي بمعدل 31.92 ، 45.94 ، 54.76٪ على التوالي.