الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 132 |  |  |
| | | from | 132 | | |
Abstract
يمثل فيروس مرض الاسهال البقرى الفيروسي مشكلة في الأبقار والجاموس في مختلف محافظات مصر على الرغم من وجود تحصينات لذلك القيروس. يفرض تنوع المستضدات المرتفع المرتبط بالأنماط الجينية لـفيروس مرض الاسهال البقرى الفيروسي قيدًا حاسمًا على تطوير لقاحات فعالة للسيطرة على المرض.
صُممت هذه الدراسة للكشف عن سلالات فيروس مرض الاسهال البقرى الفيروسي الحديثة وعزلها وتوصيفها جزيئيًا من الأمصال والمبيض والسائل المنوي للماشية المشتبه فى اصابتها إكلينيكيا وكذلك الكشف عن الاختلاف الجيني بين سلالات فيروس مرض الاسهال البقرى الفيروسي من العينات الأصلية وبعد العزل على خلايا كلى المجترات لمادين وديربى. وقد يساعد هذا في تصميم تدابير وقائية مناسبة بما في ذلك برنامج التحصين الفعال
و لقد اظهرت التجارب التطبيقية الاتى
1- بالكشف المبدئي عن فيروس مرض الاسهال البقرى الفيروسي في ثلاث عينات تمثلت في المصل والمبيض والسائل المنوي من الماشية المصابة بشكل طبيعي باستخدام النسخ العكسي الإستردادي لتفاعل البلمرة المتسلسل الخاص بالطرف الجينى 5 الغير مترجم تبين وجود ناتج تفاعل البلمرة المتسلسل (288 قاعدة نيوكليتدية مزدوجة) لعينات المصل والمبيض. بينما أعطت عينة السائل المنوي نتيجة سلبية
2- أسفرت محاولات العزل والتصنيف البيولوجى لفيروس الاسهال البقرى الفيروسي من العينات الممثلة من المصل والمبيض والسائل المنوي على كلى المجترات لمادين وديربى من خلال ثلاث تمريرات متصلة يليها اختبار الوميض الفلورسنتى و اختبار البيروكسيداز المناعي للتعرف والتصنيف البيولوجى للفيروس ان جميع العينات لم تعطى اى اثار باثولوجية على الخلايا بينما كانت نتائجها ايجابية لاختبار الوميض الفلورسنتى
3- أسفرت نتائج التعرف الجزيئى لكل من الثلاث عينات الاصلية الخاصة بالمصل والمبيض والسائل المنوي لفيروس الاسهال البقرى الفيروسي الي جانب الثلاث معزولات من نفس العينات والتي ليس لها تاثير باثولوجى على الخلايا من خلال استخدام اختبار النسخ العكسي الإستردادي لتفاعل البلمرة المتسلسل المعتمد على الطرف الجينى 5 الغير مترجم لفيروس الاسهال البقري باستخدام البادئ الخاص به324/326 وكذلك البادئ الخاص Npro B32/B31 على وجود الطرف الجينى 5 الغير مترجم الذى يبلغ 288 قاعدة مزدوجة لكل المعزولات واثنان من العينات الاصلية الخاصة بالمصل والمبيض بينما اعطت كل العينات نتائج سلبية باستخدام البادئ الخاص Npro B32/B31 مقارنة بالعترة المرجعية نادل NADL والتي اعطت نتيجة ايجابية 441 قاعدة مزدوجة وذلك من خلال التحليل الكهربى الترسيبى على الجل .
4- بالتحليل التتابعى للقواعد النيوكلوتيدية لناتج تفاعل النسخ العكسي الإستردادي لتفاعل البلمرة المتسلسل المعتمد على الطرف الجينى 5 الغير مترجم (288قاعدة مزدوجة) لكل من العينات الاضلية من المصل ((BVDV-Egypt-020-1ncp والمبيض( (BVDV-Egypt-020-3ncp ومعزولة الفيروس من المصل (BVDV-Egypt-020-2ncp ) تبين ان جميع العينات اقرب جينيا الى عترة الاسهال البقري الفيروسي -3 حيث كانت نتائج التماثل النيوكليتيدي 99.6% مع العترة الاسترالية (JN967707) و99.2% مع العترة المكسيكية والبرازيلية (JN967747, JN967729) و98% مع العترة الجنوب امريكية (KY091655) و95% الي 96.2% مع العترة الايطالية (KJ627179)
5- بالتحليل التتابعى وعمل شجرة التقارب الجينى التشعبية مقارنة بالعترات الموجودة ببنك الجينات والمعتمدة على الطرف الجينى 5 الغير مترجم تبين ان المجموعة الجينية التشعبية BVDV-3 تشتمل علي العترات المصرية التي تم الكشف عنها بعينات المصل والمبيض الى جانب العترات التي تم الكشف عنها في المصل من اجنة العجول في استراليا وامريكا الشمالية والجنوبية وكذلك العترات التي تم الكشف عنها في العجول المصابة طبيعيا في امريكا الجنوبية وايطاليا
6- بمقارنة التحليل التتابعي للقواعد النيوكلوتيدية لناتج تفاعل النسخ العكسي الإستردادي لتفاعل البلمرة المتسلسل المعتمد على الطرف الجينى 5 الغير مترجم (288قاعدة مزدوجة) لكل من العينة الاصلية من المصل ((BVDV-Egypt-020-1ncp ومعزولة الفيروس من المصل (BVDV-Egypt-020-2ncp ) تبين وجود اختلافات بسيطة في ثلاث مواقع هي 31و32و96 حيث تم احلال النيوكليتيدة G في تلك المواقع للفيروس من العينة الاصلية بالنيوكليتيدات C,A,A علي الترتيب بمعزولة الفيروس. كذلك تبين وجود اختلافات نيوكليتيدية بين الاضلية من المصل BVDV-Egypt-020-1ncp والمبيضBVDV-Egypt-020-3ncp في الموقع من 27الي40 حيث كان ATCTGGGCTCGTGT في العترة الاصلية من المصل ب GATGTCAGCTAGCA فى العترة الاصلية من المبيض بجانب اختلاف اخر في الموقع 42 حيث تم استبدال A في العترة الاصلية من المصل ب T فى العترة الاصلية من المبيض.
7- بالتحليل الافتراضي للدرجة التخصصية للبادئ B32/B31 الخاص بجين Npro علي تتابع الاسهال البقري الفيروسي -3 العترة الايطالية (KJ627179) من خلال تطابق التتابعات النيوكليتدية تبين عدم مطابقة البادئ الامامي B31 او البادئ العكسي B31 مع العترة موضع الدراسة