الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 198 |  |  |
| | | from | 198 | | |
Abstract
الملخص بالعربى
سرطان القولون هو ثالث أكثر الأورام إنتشارا فى و يعتبر سرطان القولون أيضا ثالث أكبر سبب رئيسى للوفاه بسبب السرطان حول العالم بعد أورام الرئه والبروستاتا.
ينتشر سرطان القولون فى البلدان المتقدمه أكثر منه فى البلدان الناميه، عالمياً أعداد الحالات المصابه تختلف بتسجيلها أعلى المعدلات فى دول كأستراليا، نيوزيلاند، أوروبا و الولايات المتحده الأمريكيه. بينما أقل المعدلات تظهر فى أفريقيا، جنوب ووسط قارة آسيا.
سرطان القولون و المستقيم هو مرض ينشأ من الخلايا الطلائيه المبطنه لكل من القولون و المستقيم فى قناة الجهاز الهضمى. و غالباً ما يظهر كنتيجه لتحولات فى مجال الإشارات ( وِنت )، والتى تزيد فعلياً من نشاط هذه الإشارات، هذه التحولات تكون إما موروثه أو مكتسبه، و غالباً ما تحدث فى الخلايا الجذعيه الخاصه بالتجويف المعوى. جين ( أ. بى. سى ) هو أكثر الجينات المتحوله شيوعاً فى كل أورام القولون و المستقيم. هذا الجين هو المسئول عن إنتاج بروتين ( أ. بى. سى ). هذا البروتين يعمل كمكبح فى مواجهة تراكم بروتين ( بيتا- كاتينين ). بدون بروتين ( أ. بى. سى )، يتراكم ( بيتا- كاتينين ) إلى مستويات كبيره مما يؤدى إلى انتقاله إلى النواه، و إنضمامه إلى الحامض النووى فى الخليه. حيث يعمل على تفعيل نسخ الجينات الهامه لعملية تجديد و إنقسام الخلايا الجذعيه. و فى حالة وجوده- بيتا- كاتينين – بكميات كبيره داخل النواه من الممكن أن يتسبب فى حدوث السرطان.
بخلاف العيوب فى مجال إشارات ( وِنت – أ. بى. سى – بيتا - كاتينين )، بعض العيوب الأخرى لابد لها من الحدوث لكى تصبح الخليه خليه سرطانيه.
بروتين ( بى 53 ) الذى ينتُج من جين ( تى. بى 53 ) يراقب عادةً إنقسام الخليه و يقتل الخلايا الأخرى إذا كان لديها عيوب فى مجال ( وِنت ). فى النهايه ، خط الخلايا لابد له من تحولات فى الجين ( تى. بى 53 ) ليتحول من خليه طبيعيه إلى خليه سرطانيه إجتياحيه.
البروتينات الأخرى التى لديها القدره على موت الخلايا المبرمج و التى يتم تعطيلها فى حالة سرطان القولون و المستقيم هى ( عامل تحويل النمو بيتا ) و ( دى. سى. سى ). عامل تحويل النمو بيتا تحدث له عيوب تؤدى إلى تعطيله فى نصف أورام القولون و المستقيم على الأقل. فى بعض الأحيان، عامل تحويل النمو بيتا لا يتعطل و لكن بروتين آخر يسمى ( س. م. أ. د ) يتعطل. بروتين ( دى. سى. سى) غالباً ما يتم حذف قطعه من الكروموسوم الخاص به فى سرطان القولون و المستقيم.
فلورويوراسيل-5 تم إستعماله كعلاج للسرطان على مدار أربعين عاماً. و هو يعمل بعدة طرق. و لكن فى الأساس. يعمل كمثبط للبروتين المسئول عن تصنيع الثيميديلات، معترضاً بذلك تأثير هذا الإنزيم، حيث يمنع تصنيع ثيميدين البيريميدين والذى يعتبر النوكلوزيد المطلوب لعملية النسخ المتماثل للحامض النووى. البروتين المسئول عن تصنيع الثيميديلات يكسب الديوكسى يوريدين أحادى الفوسفات مجموعة ميثيل ليشكل ثيميدين أحادى الفوسفات. إعطاء دواء الفلورويوراسيل-5 يسبب نقص فى الثيميدين أحادى الفوسفات، لذلك فإن الخلايا السرطانيه سريعة الإنقسام تخضع لعملية موت خلوى.
الإستروجينات الطبيعيه هى مواد كيميائيه نباتيه موجوده فى الأطعمه ذات الأصل النباتى، فهى لها تأثيرات مشابهه للإستروجين وكذلك مضاده للإستروجين إستنادا إلى تشابهها فى التركيب مع هورمون الإستروجين، وأيضا إلى إلتحامها مع مستقبلات الإستروجين- ألفا الموجوده عامة فى أنسجة الثدى والرحم- و بيتا المنتشره فى العظام والمخ والمثانه. توجد ثلاثة أنواع من الإستروجينات النباتيه: أيزوفلافون، ليجنان و كوميستان. ولكن الأهم بين الفئات الثلاثه هى مركبات الأيزوفلافون، والتى تتميز بخاصيه تعديل تأثير مستقبلات الإستروجين بشكل إختيارى.
مركب بيوكانين-أ، أحد مركبات الأيزوفلافون الغذائيه. يتواجد بشكل عام فى نباتات الفول الصويا و البرسيم الأحمر، يتميز بخواصه المضاده للسرطان. مركب بيوكانين-أ معروف بقدرته على زياده السميه الخلويه الناتجه عن البروتين المسئول عن موت الخلايا السرطانيه فى البروستاتا.أثبتت إحدى الدراسات السابقه تمكن مركب بيوكانين-أ من زيادة حساسية الخلايا السرطانية لعملية الموت المبرمج عن طريق تأثيره على كل من الاشارات الداخليه والخارجيه للموت المبرمج للخلايا. أظهر مركب بيوكانين-أ أيضا نشاطا مضادا للإنقسام و للإلتهاب.
أهداف البحث:
تم القيام بهذا البحث بغرض اختبار النمذجة الجزيئية لمركب البيوكانين-أ على خلايا سرطان القولون لهذه المركب على سرطان القولون، كما تم البحث لتحديد التأثير العلاجى المحتمل لاضافة بيوكانين-أ على السمية الخلوية لدواء 5-فلورويوراسيل في خلايا سرطان القولون خارج الجسم (خلايا) و داخل الجسم (الفئران) والتحقيق في الآليات الكامنة وراء التغيير الناتج عن هذه الاضافة.
تصميم الدراسة:
• عمل دراسة نمذجة جزيئية لمركب بيوكانين-أ على خلايا سرطان القولون
• تحديد حساسية خلايا سرطان القولون للمعالجة وذلك عن طريق اختبار السلفورهودامين-بى
• دراسة تأثير التأزرية بين مركب بيوكانين-أ و 5- فلورويوراسيل باستخدام برنامج كالكوسن
• دراسة تأثير المعالجة على الاشارات المنظمة لدورة انقسام الخلايا والمنظمة للموت المبرمج للخلايا
• دراسة تأثير المعالجة على اشارات هرمون الاستروجين عن طريق دراسة مستوى مستقبلات الاستروجين
• دراسة تأثير المعالجة على النشاط المضاد للأكسدة على خلايا السرطان
• دراسة تأثير المعالجة على إنقسام و تولد الأوعية لخلايا السرطان عن طريق تحليل الصبغة المناعية
• دراسة تأثير المعالجة على نسبة التنخر فى الانسجة السطانية و كذلك فى الانسجة المخاطية المعوية
نتائج الدراسة:
1- بيوكانين-أ يعزز بالتآزر سمية دواء 5-فلورويوراسيل فى خطوط خلايا سرطان القولون (خطوط خلايا Caco2 و HCT-116)
2- مزيج بيوكانين-أ و 5-فلورويوراسيل أدى الى ايقاف فسفرة مركب اى كى تى فى خطوط خلايا سرطان القولون (خطوط خلايا Caco2 و HCT-116)
3- مزيج بيوكانين-أ و 5-فلورويوراسيل أدى الى تعزيز نسبة مركب البيتاكاتينين المفسفر على مركب البيتاكاتينين الكلى
4- بيوكانين-أ مع اضافة 5-فلورويوراسيل ادى الى زيادة التعبير الجيني لكاسباس 3
5- ادى بيوكانين-أ بعد مزجة مع 5- فلورويوراسيل الى زيادة كبيرة في مستوى فى إى جى إف
6- سيكلين دى 1 , انخفض بشكل ملحوظ في الخلايا بعد معالجتها بمزيج من بيوكانين – أ و مركب 5- فلورويوراسيل
7- التآزر بين بيوكانين-أ و 5- فلورويوراسيل أدى إلى نقصان ملحوظ فى التعبير لجين السرفيفين.
8- ميتالوبروتيناز-2 إنخفض بشكل ملحوظ فى خلايا السرطان التى تمت معالجتها بمزيج من بيوكانين-أ و 5 – فلورويوراسيل
9- مستوى مضاد الأكسده الجلوتاثيون المختزل زاد بشكل ملحوظ بعد اضافة مركب بيوكانين-أ لمركب 5-فلورويوراسيل لعلاج خلايا سرطان القولون
10- مستوى المالوندايألديهايد انخفض نتيجة التآزر بين بيوكانين-أ و 5 – فلورويوراسيل فى علاج خلايا سرطان القولون
11- التحليل الهيستولوجى أظهر زيادة فى نسبة التنخر فى الانسجة السرطانية بعد العلاج بمركب بيوكانين- أ بالتآزر مع 5-فلورويوراسيل.
و يستخلص من هذه الدراسة أن مركب بيوكانين-أ يعزز بالتآزر من فاعلية العلاج الكيميائى فى كل من خلايا سرطان القولون (خطوط خلايا Caco2 و HCT-116) و أيضا فى خلايا سرطان القولون فى الأجسام الحية.حيث أظهر مركب بيوكانين-أ تأثيرا مؤزرا لمركب 5-فلورويوراسيل كمضاد للأورام. هذا التأثير عن طريق تثبيط انقسام الخلايا و و تولد الأوعية الدموية لها. كذلك قام بيوكانين-أ بحماية الخلايا من التأكسد عن طريق زيادة الجلوتاثيون المختزل و تقليل المالوندايألديهايد. و هذا التأثير تم باستخدام مزيج من 20 مجم/كجم من بيوكانين-أ و 5 مجم/كجم من 5-فلورويوراسيل. و هذا التأثير افضل من العلاج بجرعة 20 مجم/كجم من 5-فلورويوراسيل كعلاج أحادى مما قلل من السمية الناتجة عن استخدام جرعة كبيره من 5- فلورويوراسيل فى علاج سرطان القولون.