الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 159 |  |  |
| | | from | 159 | | |
Abstract
مرض الجلد العقدى هو مرض خطير يصيب الجلد والذى يعتبر واحدا من الأمراض الفيروسية الأكثر أهمية من الناحية الاقتصادية التى تصيب الماشية. هذاالمرض مستوطن في مصر، وهناك حاجة إلى مزيد من العزل والتوصيف لفيروس الجلد العقدى لتوفير طرق أكثر موثوقية للكشف والسيطرة على تفشي الفيروس, لذلك تظهر هذه الدراسة تجارب للكشف الجزيئي وعزل الفيروس.حيث أظهرت التجارب العملية مايلى:-1-اوضحت تجارب الكشف عن فيروس مرض الجلد العقدى في عينات العقد الجلدية, عينات الدم, عينات سيرم من الماشية والغنام و الماعز وعينات المسحات المستقيم من خلال استخدام إختبار تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل ذو الوقت الحقيقى عن تواجد الفيروس في كل العينات كما أوضحت ان اكثر كمية من الفيروس تتواجد في العينات المأخوذة من الجلد.2-تم عزل فيروس مرض الجلد العقدى من ثلاث عينات عقد جلدية من حيوانات الماشية المشتبه بها عن طريق ثلاث تمريرات متصلة على خلايا المادين ديربى المزروعة. وهذا أدى إلى ظهور الأثار الباثولوجية المميزة للفيروس والذى إتضح في شكل تقارب الخلايا وتجمعها معا وتكوين عناقيد وزاد هذا الأثر تدريجيا حتى سقوط 70-90% من الخلايا.3-تم عزل فيروس مرض الجلد العقدى من ثلاث عينات عقد جلدية من حيوانات الماشية المشتبه بها عن طريق ثلاث تمريرات متصلة على الغشاء الكوريونى لأجنة البيض المخصب الخالى من الأمراض. وقد أدى الفيروس المعزول إلى ظهور الأثر الباثولوجى المميز والذى ظهر في شكل احتقان وتجلط للدم في الأوعية الدموية الخاص بالغشاء بالإضافة الى ظهور إصابات تنكرزية بيضاء صغيرة ومتعددة واصبح الغشاء أيضا معكر.4-تم إعادة إختبار للعينات المعزولة بواسطة إختبار تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل ذو الوقت الحقيقى بعد تمريرهم على خلايا المادين ديربى والغشاء الكوريونى. وأوضحت النتائج ان المعزولات اعلى من العينات الأصلية في قيمة الدورات الازمة لتحديد الفيروس.5-تم إختبار عينات السيرم الخاصة بالماشية والأغنام والماعز بواسطة أختبار الإليزا وذلك للكشف عن تواجد الأجسام المناعية الخاصة بعائلة الفيروسات الجدرية العنزية. أسفرت النتائج عن عينة وحيدة إيجابية في الماشة. كما تم سحب عينات السيرم مرة أخرى بعد شهر من عينات الأبقار التي كانت سالبة في إختبار الإليزا السايق وإعادة إختبارهم مرة أخرى بواسطة الإليزا وكانت العينات هذه المرة إيجابية.6-تم عمل تعرف جزيئى لفيروس مرض الجلد العقدى في 13 عينة عقد جلدية وعينتان من قشرة الجلد بواسطة إختبار إنزيم البلمرة المتسلسل التقليدي للجين المسئول عن بروتين الإندماج. أوضحت النتائج انه 11 عينة فقط من العقد الجلدية كانت إيجابية وعينة واحدة من القشرة كانت إيجابية واعطوا الطول المناسب للجين وهو 410 قاعدة مزدوجة.تم إعادة عمل الإختبار لأربع عينات من ضمنهم عينة كانت سلبية لزيادة وضوح الحزمة المنتجة لهم وكانت النتيجة زيادة في حدة ووضوح ثلاث عينات كانت إيجابية ولكن ضعيفة قبل ذلك بالإضافة إلى ظهور حزمة ضعيفة إيجابية للعينة السابق تشخيصها كعينة سلبية للفيروس.7-تم عمل تعرف جزيئى لفيروس مرض الجلد العقدى في 13 عينة عقد جلدية وعينتان من قشرة الجلد وعينة عبارة عن تحصين ضد مرض جدرى الأغنام بواسطة إختبار إنزيم البلمرة المتسلسل التقليدي للجين المسئول عن انزيم البلمرة 30 .وقد تم أستخدام التحصين ضد مرض جدرى الأغنام كمرجع. أوضحت النتائج ان عينتا القشرة الجلدية كانتا إيجايتين بالإضافة الى 7 عقد جلدية واعطوا الطول المناسب للجين وهو 172 قاعدة مزدوجة ولكن نتيجة عينة التحصين ضد مرض جدرى الأغنام بالإضافة الى 6 عينات عقد جلدية كانت سلبية.8-تم عمل تتابع جينى لعدد 4 عينات عقد جلدية.9-وتم مقارنة السلالات الأربعة ببعضها البعض بعد التتابع الجينى عن طريق التراصف وأوضحت النتاحج نسبة تطابق قدرها 100% بين سلالات الدراسة الأربعة. ثم بعد ذلك تم عمل تراصف بين السلالات الأربعة وسلالات فيروس مرض الجلد العقدى, فيروس جدرى الأغنام وفيروس جدرى الماعز المنشورة على بنك الجينات وأوضحت النتائج نسبة تطابق تتراوح بين (98-99%) بين سلالات الدراسة وسلالات فيروس مرض الجلد العقدى المنشورة على بنك الجينات.10-تم بناء الشجرة الجينية لحساب درجة التقارب وكذلك علاقة التطور بين سلالات الدراسة الأربعة وسلالات فيروس مرض الجلد العقدى, فيروس جدرى الأغنام وفيروس جدرى الماعز المنشورة على بنك الجينات. وأظهر تحليل الشجرة الجينية أن سلالا الدراسة الأربعة ترتبط بشكل وثيق بسلالات فيروس مرض الجلد العقدى عن سلالات فيروس جدرى الأغنام وفيروس جدرى الماعز.