الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 277 |  |  |
| | | from | 277 | | |
Abstract
تعاني الخيول العربية في مصر من بعض المشاكل والتى تشمل التهابات الجهاز التنفسي، والإجهاض، والولادة المبكرة، وموت المهارى (أقل من سنة واحدة) والخيول البالغة (أكثر من سنة) والتى كانت تعانى من اعراض تنفسية. لذا هدفت الدراسة الحالية إلى الكشف عن الانواع المختلفة من فيروس الهربس الخيلى والمتداول بين هذه الخيول ومعرفة مدى انتشار كل نوع للمساعدة في السيطرة والوقاية من إصابات هذا الفيروس بين الخيول العربية في مصر.تم تجميع حوالي 153 عينة وفحصها من خلال اختبار البلمرة المتسلسل الاجماعى المتداخل للكشف عن عينات إيجابية لوجود فيروس الهربس الخيلى.وأجريت محاولات عزل الفيروس على الغشاء الكوريونى للبيض الخالي من المسببات المرضية وعلى خلايا الزرع النسيجى من كليه الارنب-13 والتاكد من العزلات عن طريق الاختبارات غير المصلية (الفحص الباثولوجى المرضي، المجهر الإلكترونى و اختبارالتلزن الدموي) و الاختبارات المصلية (اختبار الوميض الفلوروسنتى الغير مباشرو تثبيط التلزن الدموى). الى جانب الكشف السيرولوجى ايضا تم التصنيف الجزيئى لعترات الهربس الخيلى المتداولة عن طريق اجراء اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل الشبه المتداخل واجراء التحليل الجينى لمنتجات اختبار البلمرة المتسلسل الاجماعى المتداخل.اظهرت النتائج العملية ماياتى :1-الفحص الأولي للعيات عن طريق اختبار البلمرة المتسلسل الاجماعى المتداخل أسفرت عن ايجابية 24/153)) والتي تشمل 24.1٪ حالات الإجهاض (7/29)، 39.28٪ حيوانات نفوق من المهارى الصغيرة (11/28)، 22.2٪ نفوق من الحيوانات البالغة (4/18) ، 3.33٪ مسحات الأنف (2/60). لم يتم الكشف عن عينات إيجابية بين عينات مسحات المهبل التي تم جمعها (0/15) ولا عينات الولادة المبكرة (0/3).2-محاولات عزل الفيروس من العينات الايجابية لوجود فيروس الهربس الخيلى على الغشاء الكوريونى اظهرت وجود اصابه تنكرزية على الغشاء والتى تزاد فى العدد بازياد عدد التمريرات3-محاولات عزل الفيروس من العينات الايجابية لوجود فيروس الهربس الخيلى ثلاث مرات أعمى على خلايا الزرع النسيجى (كليه الارنب-13 ) نتجت عن استدارة وتجميع الخلايا المصابة فى صورة عناقيد والتى انتشرا على سطح الخلايا فى غضون 3-5 أيام بعد الحقن ( مميزة لوجود فيروسات الهربس الخيلى الفا ) و لكن تاخر ظهور التغيرات حتى 7-14 أيام بعد الحقن (مميزة لوجود فيروسات الهربس الخيلى جاما)4-اظهر الفحص الهستولوجى للغشاء الكوريونى المصاب بفيروس الهربس الخيلى نموا كثيفا الى حد ما على خلايا طبقة الاكتوديرم والميزوديرم مع وجود جسيمات كبيرة لفيروس فى النواه الخاصه بالخلايا .5-كشف المجهر الإلكتروني للغشاء الكوريونى المصاب عن جزيئات الفيروس مغلفة مع مركز الظلام المكثف وبعض ينظر إليها على أنها نجمة مثل أو تقريبها مع مركز شفاف الإلكترون مميزة لعائلة الهربس الخيلى.6-أضهر اختبار التلزن الدموى مع فيروس الهربس الخيلى باستخدام كرات الدم الحمراء للخيول والاغنام والدجاج والفئران على قدرة الفيروس لاحداث تلازن دموى لخلايا الدم الحمراء للفئران .7-اظهر التعرف السيرولوجى عن طريق اختبار الفلورسنت المشع الغيرمباشر واختبار تثبيط التلازن الدموى على غشاء الكوريونى المصاب وخلايا الزرع النسيجى (كلى الارنب -13) وميض فلوروسنتى ذات لون اصفر مخضر حول نواه الخلايا والغشاء الكوريونى المصابه ووجود شكل زر على التتالى باستخدام سيرم مرجعى ضد فيروس الهربس الخيلى 1و 2.8-التفرقه الجزيئية لمعزولات الهربس الخيلية عن طريق اختبار البلمرة المتسلسل الشبه المتداخل لكل من الانواع الاتية: فيروس الهربس الخيلى –1(جليكو بروتين (H و 2 و4 و 5 )جليكو بروتين B). نتجت عن وجود 3 عينات ايجابية لفيروس الهربس الخيلى -1 ،و 20 عينة ايجابيه لوجود فيروس الهربس الخيلى 2 ( 3 اجنة مجهضه و 11 عينة نفوق من مهارى و 4 عينات نفوق من حيوانات بالغة و 2 عينة مسحات انفية ) ولم يتم الكشف عن فيروس الهربس الخيلى 4 او 5 .9-التحليل الجينى الجزئي لجين البلمرة للحمض النووي (ناتج اختبار البلمرة المتسلسل الاجماعى المتداخل) لعدد 15عينة (3 عينات اصلية صنفت فيروس الهربس الخيلى 2، 11 معزولة منها 10 لفيروس الهربس الخيلى 2، ومعزولة لفيروس الهربس الخيلى1 وعترة واحدة غير مصنفه) وذلك لتاكيد نتائج اختبار البلمرة المتسلسل شبه المتداخل والمساعدة في الكشف عن عترات عير معرفة (فيروس الابله الخيلى5 (AHV-5) . رقم العينات المتسلسلة على بنك الجينات كانت MF599337 و KY401161 و KY401162 و KY401163 و KY421047 و KY407571 و KY407570 و KY407569 و KY407573 و KY407572 و KY421048 و KY628992 و KY628993 و KY628994 و KY628995.10-اجرت شجره التقارب الجينى مقارنة بين هذه العترات وبين العترات المجودة ببنك الجينات وقد اظهرت ان عترة الهربس الخيلى 1 -2014 كانت مرتبطه بسلالات من استراليا وفرنسا (KF434373، KC924775)و سلالات الهربس الخيلى 2مصر مرتبطه بسلالات سويسرا و المملكة المتحده (HQ247787، HQ247792 و KM924294) و وسلاله فيروس الابله 5(AHV-5) مصر كانت قريبة لنفس الشجرة الجينية من سلالات عترة (AHV-5)من أستراليا وكندا (KC825357، FJ798319).