الفهرس 
introductionand aim of workOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 215 |  |  |
| | | from | 215 | | |
Abstract
الملخص العربى
إن استخدام الطرق العلاجية التي تزيد من مستوى الببتيد شبيه الجلوكاجون-١ (جى ال بى-١) الذي يقلل الشهية يعد من العلاجات الواعدة للسمنة. وتجدر الاشارة ان جى ال بى-١ الذي يفرزه الجسم يتم تكسيره بسرعة عن طريق انزيم ببتيداز الببتيد الثنائى-٤ (الدى بي بي-٤)، وعلى هذا النحو، فان محاكيات جى ال بى-١ أو مثبطات الدى بي بي-٤ تمثل أساليب علاجية واعدة. ومن المثير للاهتمام، ان مرضى السمنة الذين يتلقون مثل هذه الأدوية أظهروا تحسن فى توازن الكوليسترول والدهون الثلاثية، إلا أن آليات هذا التحسن ليست معروفة بعد. تلعب بعض ناقلات الكاسيت الملزمة بالادينوسين ثلاثى الفوسفات، بما في ذلك ايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١، دورا أساسيا في نقل الكولسترول العكسي الى الكبد وفي تشكيل الليبوبروتين عالي الكثافة. وهذه الناقلات تخضع فى تنظيمها النسخي لمستقبلات الكبد اكس ألفا (ال اكس ار-الفا). ومن هنا كان هدفنا الاول دراسة مدى صحة الافتراض أن محاكيات جى ال بى-١و/أو مثبطات الدى بي بي-٤ تعدل تعبير ايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١ في الخلايا الشحمية بواسطة ال اكس ار-الفا وبالتالي تؤثر على توازن الكوليسترول.
بما ان بعض العقاقير الخافضة للكوليسترول (الستاتين)غير فعالة تقريبا في الحد من الدهون الثلاثية، أو تعزيز مستويات البلازما من كوليسترول الليبوبروتين عالي الكثافة. لذا نحتاج الى اضافة أدوية أخرى لتحقيق هدف تقليل الكوليسترول منخفض الكثافة مع خفض الدهون الثلاثية أو تقليل الكوليسترول منخفض الكثافة مع تعزيز الكوليسترول عالي الكثافة في علاج اضطراب شحوم الدم لمرضى السكري، ومن هنا فاننا قمنا بإضافة العقار مثبط الدى بي بي-٤ الفيلداجليبتن الى علاج البرافاستاتين ودراسة تأثير هذا المزيج على خروج الكوليسترول من الخلايا الشحمية. هذه التأثيرات من عقار الستاتين يمكن أن يعزى سببها إلى تأثير الستاتين على الال اكس ار الذي ينظم تعبير ناقلات الكوليسترول في الدم عن طريق ايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١.وعليه فان انخفاض تعبير هذين الناقلين يمكن أن تؤدي في النهاية إلى انخفاض خروج الكولسترول من الأنسجة الطرفية مما يؤدي إلى انخفاض مستويات الكوليسترول عالي الكثافة. واذا كان التلاعب في مسار الال اكس ار يمكن أن يكمل تأثير هذه العقاقير الخافضة للكوليسترول، فان حث الال اكس ار بروابط اصطناعية مثل T091317 تؤدى الى ارتفاع مستوي الدهون الثلاثية فى الدم مما يحد من استخدامها. ومن هنا نحن نفترض فى هدفنا الثانى للرسالة أن اضافة عقار الفيلداجليبتين الى البرافاستاتين ستحسن خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية.
ومن أجل تحقيق أهدافنا، استخدمنا خلايا -L133T كنموذج للخلايا الشحمية وأجريت الدراسة على جزءين:
لتحقيق الهدف الاول، تم تقسيم الدراسة إلى المجموعات الثلاثة التالية:
أ) المجموعة الضابطة: الخلايا الشحمية -L133T الغير المعالجة ،
ب) مجموعة الفيلداجليبتين: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T بمثبط الدى بي بي-٤ الفيلداجليبتن ( ٢ نانومولار) ،
ج) مجموعة الاكسينيدين-٤: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T بأحد محاكيات جى ال بى-١ الاكسينيدين-٤ ( ٥ نانومولار).
تم تحديد تعبير الجينات والبروتينات لكل من ايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١ والال اكس ار كما تم ربط هذا التعبير بخروج الكوليسترول. كما اجري تحليل مستويات التعبير الجيبى والبروتينى لكل من الانترلوكين ٦، اللبتين وناقل الجلوكوز-٤. وبالإضافة إلى ذلك، تم اغلاق مسار الال اكس ار-الفا وتحديد تأثيره على التعبير الجيني لكل من الايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١ والال اكس ار وتقييم خروج الكوليسترول بعد اغلاق المسار.
بينما لتحقيق الهدف الثانى، تم تقسيم الدراسة إلى ٦مجموعات كما يلي:
أ) مجموعة البرافاستاتين: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T باستخدام عقار البرافاستاتين الخافض للكوليسترول (١٠ ميكرومولار) ،
ب) مجموعة T091317: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T باستخدام T091317 الرابط الاصطناعي للال اكس ار (١٠ ميكرومولار)،
ج) مجموعة البرافاستاتين وT091317: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T باستخدام البرافاستاتين وT091317 (١٠ ميكرومولار لكل منهما)،
د) مجموعة البرافاستاتين والفيلداجليبتين: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T باستخدام البرافاستاتين والفيلداجليبتين (١٠ ميكرومولار لكل منهما)،
ه) مجموعة الفيلدغليبتين: تم علاج الخلايا الشحمية -L133T باستخدام بمثبط الدى بي بي-٤ الفيلداجليبتن (١٠ ميكرومولار)،
و) المجموعة الضابطة: الخلايا الشحمية -L133T الغير المعالجة.
تم تحديد تعبير الجينات والبروتينات لكل من ايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١ والال اكس ار كما تم ربط هذا التعبير بخروج الكوليسترول. وبالإضافة إلى ذلك، تم اغلاق مسار الال اكس ار-الفا وتحديد تأثيره على التعبير الجيني لكل من الايه بى سى اي -١ وايه بي سي جي-١ والال اكس ار وتقييم خروج الكوليسترول بعد اغلاق المسار.
وتتلخص نتائج الدراسة الحالية على النحو التالي:
(١) لوحظ وجود مستويات مرتفعة من التعبير الجيني والبروتينات لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١، وال اكس ار وناقل الجلوكوز-٤ في مجموعتى الفيلداجليبتين والاكسينيدين-٤ مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠).
(٢) انخفضت، بشكل ملحوظ و إحصائى ، مستويات التعبير الجيني والبروتينى لكل من الانترلوكين ٦ واللبتين في مجموعتى الفيلداجليبتين والاكسينيدين-٤ مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠).
(٣) يوجد ارتفاع، بشكل ملحوظ و إحصائى، فى خروج الكوليسترول في كل من مجموعتى الفيلداجليبتين والاكسينيدين-٤ مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠). هذا يوحي بأن علاج الجى ال بى-١ يحسن نسبة خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية.
(٤) بعد اغلاق مسار الال اكس ار-الفا انخفضت، بشكل ملحوظ، مستويات التعبير الجيني والبروتينى لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١ كما انخفضت نسبة خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية في كل من المجموعتين مقارنة بالمجموعة الضابطة. وفقا لذلك، فمن المعقول أن نفترض أن المسار المتحكم هو ال اكس ار / ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١.
(٥) بعد ذلك، بياناتنا أظهرت انخفاضا كبيرا في مستويات التعبير الجيني والبروتينات لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١، وال اكس ار مجموعة البرافاستاتين مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠). بينما لوحظ مستويات مرتفعة بشكل احصائى من التعبير الجيني والبروتينات لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١، وال اكس ار في مجموعة T091317، مجموعة البرافاستاتين وT091317، مجموعة البرافاستاتين الفيلدغليبتين ومجموعة الفيلدغليبتين مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠).
(٦) يوجد انخفاض ملحوظ فى خروج الكوليسترول في مجموعة البرافاستاتين (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠) مقارنة بالمجموعة الضابطة. بينما اظهر خروج الكوليسترول ارتفاع بشكل ملحوظ في مجموعة T091317، مجموعة البرافاستاتين وT091317، مجموعة البرافاستاتين الفيلدغليبتين ومجموعة الفيلدغليبتين مقارنة بالمجموعة الضابطة (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠). وهذا يشير إلى أن إضافة الرابط الاصطناعي للإل اكس ار أو الفيلداجليبتين إلى البرافاستاتين يحسن نسبة خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية.
(٧) بعد اغلاق مسار الال اكس ار-الفا انخفضت بشكل ملحوظ مستويات التعبير الجيني والبروتينى للال اكس ار كما انخفضت ايضا بشكل ملحوظ مستويات خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠) في كل المجموعات مقارنة بالمجموعة الضابطة. وفقا لذلك، فمن المعقول أن نفترض و نؤكد الدور الهام لمسار ال اكس ار / ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١ في خروج الكولسترول من الخلايا الشحمية.
(٨) بالنظر في التعبير الجينى لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١ بعد اغلاق مسار الال اكس ار-الفا، سواء فى مجموعة T091317 او مجموعة البرافاستاتين وT091317 فقد أظهروا ارتفاع كبير غير متوقع (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠) مقارنة بالمجموعة الضابطة والذي قد يكون نتيجة الطبيعة الغير محددة لل T091317 التي تحفز أيضا البى اكس ار بنفس قوة تحفيزها للال اكس ار.
(٩) انخفضت بشكل ملحوظ مستويات التعبير الجينى لكل من ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١ في مجموعة البرافاستاتين، مجموعة البرافاستاتين والفيلداجليبتين ومجموعة الفيلداجليبتين بعد اغلاق مسار الال اكس ار-الفا (مستوى إحصائى أقل من ٠٥,٠) ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ووفقا لذلك، فمن المعقول أن نفترض أن المسارالمتحكم هو ال اكس ار / ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١.
في الختام، تقدم الدراسة الحالية دليل على أن العلاجات المستندة إلى الجى ال بى-١ تعدل تعبير ايه بى سى اي -١/ ايه بى سي جي-١ في الخلايا الشحمية ويحتمل أن يكون هذا التعديل من خلال مسار الال اكس ار-الفا وهذه العملية تؤدى في نهاية المطاف الى تحسين نسبة خروج الكولسترول. وقد تفسر هذه البيانات، على الأقل جزئيا، التحسن في مستويات الكولسترول عالي الكثافة الملاحظ في المرضى الذين يتلقون هذا العقار. كما أظهرنا أن استخدام مزيج من الفيلداجليبتين والستاتين يؤدى الى تحسين نسبة خروج الكولسترول من خلال مسار ال اكس ار / ايه بى سى اي -١، ايه بى سي جي-١ وبالتالي في مرضى السكري الذين يعانون من اضطراب الدهون الثلاثية، هذا المزيج لا يقلل فقط من كمية العقار المستخدم (حيث ان الفيلداجليبتين هو عقار مضاد للسكري) ولكن أيضا قد يكمل تأثير الستاتين على عوامل الخطر القلبية الوعائية.