الفهرس 
ReviewOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 32 |  |  |
| | | from | 32 | | |
Abstract
يعتبر فيروس مرض النيوكاسل المسبب للمرض شديد العدوى والقاتلة التي تؤثر على معظم أنواع الطيور في جميع أنحاء العالم. أظهر تسلسل وتحليلات النشوء والتطور من تسلسل كامل أو جزئى للجين F التنوع الجيني الكبير لسلالات فيروس النيوكاسل في السنوات الماضية. بالرغم من استخدام برامج التحصين المكثفة فى مصر لا يزال تفشى فيروس مرض النيوكاسل فى كثير من قطعان الدواجن المحصنة. لذا فالهدف الرئيسي من هذا العمل هو العزل و التعرف على فيروس النيوكاسل بعزله من قطعان الدجاج المصابة من مختلف المحافظات (الجيزة، القليوبية، الشرقية، الفيوم، المنيا والمنوفية) في مصر بين عامي 2013 و 2014 وكذلك تحديد نوعه المرضى والجينى.
ومن التجارب التطبيقية، تم الكشف عن النتائج التالية:
1.أظهرت محاولات عزل فيروس مرض النيوكاسل من العينات المشتبه فيها من خلال الحقن في التجويف اللفائفى لبيض الدجاج المخصب الخالى من مسببات الامراض نتائج إيجابية ( بعد ثالث تمريرة ) فى 7 من أصل 7 عينات من محافظة الغربية، 2 من أصل 14 عينة من محافظة الجيزة، 4 من أصل 4 عينات من محافظة الفيوم، وفى عينة واحدة من محافظة الشرقية، 3 من أصل 3 عينات من محافظة المنيا، 7 من أصل 7 عينات من محافظة القليوبية و4 من أصل 4 عينات من محافظة المنوفية.
2. وأظهرت نتائج تقييم العزلات الفيروسية المشتبه بها بعد التمريرة الثالثة عيارية تتراوح بين 5 – 10 لوج2 وحدة تلزن دموى/ملليليتر من عينة الفيروس باستخدام اختبار التلزن الدموى وكذلك عيارية تتراوح بين 6 – 5‚7 لوج10 جرعة إحداث عدوى فى بيض الدجاج المخصب/ملليليتر من عينة الفيروس باستخدام اختبار معايرة القدرة على إحداث العدوى.
3.أظهرت نتائج الاستعراف السيرولوجى على المعزولات الفيروسية نتائج إيجابية مع عدد 23 من أصل 40 عينة من خلال اختبار تثبيط التلزن الدموي باستخدام مصل متخصص لفيروس مرض النيوكاسل.
.4أوضح تحديد النوع المرضى لفيروس مرض النيوكاسل (من خلال احتساب متوسط وقت الوفاة لأجنة بيض الدجاج المخصب مؤشر المرضية داخل المخ) أن العينة المعزولة من الجيزة كانت عالية الضراوة (مع متوسط وقت الوفاة 48 ساعة ومؤشر المرضية داخل المخ أن العينة المعزولة من الجيزة كانت عالية الضراوة (مع متوسط وقت الوفاة 48 ساعة ومؤشر المرضية داخل المخ 625‚1) في حين أن العينة المعزولة من القليوبية كانت لقاحية منخفضة الضراوة (مع متوسط وقت الوفاة 96 ساعة ومؤشر المرضية داخل المخ 4375‚. .
.5أوضح التعرف الجزيئي لفيروس مرض النيوكاسل باستخدام تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل الناسخ العكسى لاكثار الجين الخاص ببروتين F للفيروس وجود نتيجة ايجابية مع المعزولات المحلية لفيروس النيوكاسل من خلال وجود ناتج اكثار الجين عند الحجم المتوقع الصحيح (275 زوج من النيوكلوتيدات) باستخدام تقنية التحليل الكهربي على جل الاجاروز.
.6 وأظهرت دراسة و تحليل التسلسل النيوكلوتيدى للمنطقة عالية التغير وموضع الانشطار الجين الخاص ببروتين F للفيروس وتحليل النشوء والتطور للفيروس أن الفيروس المعزول من محافظة الجيزة أظهرأعلى نسبة تماثل (5‚90٪) مع فيروس مرض النيوكاسل العترة اللقاحية كولون 30 وكان أكثر تشابها (07‚90٪) مع فيروس مرض النيوكاسل عترة لاسوتا النوع الجينى II من الانواع الجينية الأخرى، وتراوحت نسبة التماثل بينه وبين السلالات المصرية لفيروس مرض النيوكاسل 2005 و 2006 بين 5‚89٪ و 5‚90٪، في حين أظهر فيروس مرض النيوكاسل المحلي المعزول من محافظة القليوبية أعلى نسبة تماثل (97٪) مع فيروس مرض النيوكاسل / استراليا / 99-1997PR-32 وكان أكثر تشابها (7‚93٪) مع فيروس مرض النيوكاسل عترة أولسترالنوع الجينى I وتراوحت نسب التماثل بينه وبين السلالات المصرية لفيروس مرض النيوكاسل 2005 و 2006 بين 8‚85٪ و 5‚87٪.
7.وأظهرت دراسة تتابع مواضع الأحماض الأمينية للمنطقة عالية التغير وموضع الانشطار الجين الخاص ببروتين F للفيروس ، وجود نمط من 112R/K-R-Q-R/K-R↓F117 المميزة لسلالة فيروس مرض النيوكاسل عالية الضراوة لفيروس مرض النيوكاسل المعزول من الجيزة ونمط 112G/E-K/R-Q-G/E-R↓L117 المميزة لسلالة فيروس مرض النيوكاسل اللقاحية منخفضة الضراوة لفيروس مرض النيوكاسل المعزول من القليوبية.
8. تم إرسال التسلسل النيكلوتيدى للسلالات المعزولة لفيروس مرض النيوكاسل إلى بنك الجينات ونشرت مع أرقام الانضمام KR535623 وKR535624 للسلالات المحلية لفيروس مرض النيوكاسل المعزولة من القليوبية والجيزة على التوالي.